题目 1:CRISPR-Cas9系统中,PAM序列的核心作用是:
正确答案:C. 被Cas9蛋白识别,是启动DNA解链和切割的前提
解析:PAM是紧邻靶DNA序列的一个短序列(如NGG)。它的主要功能是作为"自我/非我"的识别标志。Cas9蛋白首先扫描DNA,识别PAM序列,然后才会在PAM上游解开DNA双链,让sgRNA进行互补配对。没有正确的PAM,Cas9无法有效结合并切割目标DNA。
题目 2:在设计sgRNA时,除了考虑与目标DNA的互补性,还需要注意:
正确答案:B. 确保目标DNA位点旁存在正确的PAM序列
解析:这是设计的关键前提。sgRNA负责识别PAM上游的DNA序列。因此,我们必须根据基因组中已有的PAM序列(如NGG)的位置,来选择其上游的序列作为sgRNA的靶向目标。PAM本身是DNA上的序列,不包含在sgRNA的设计中。
题目 3:CRISPR-Cas9系统中,sgRNA的主要功能是:
正确答案:C. 引导Cas9蛋白靶向特定DNA序列
解析:sgRNA(单链向导RNA)通过其序列与目标DNA互补配对,起到"导航"作用,引导Cas9蛋白到达特定基因组位置。切割DNA由Cas9蛋白执行,PAM序列是Cas9的识别位点,修复由细胞自身机制完成。
题目 4:在临床治疗遗传病时,CRISPR-Cas9技术面临的最大挑战不包括:
解析:CRISPR-Cas9的核心正是实现基因组定点编辑。主要挑战包括脱靶风险、免疫反应和递送效率等问题。
题目 5:目前国际社会对人类生殖细胞基因编辑的主要共识是:
解析:出于伦理和安全考虑,多数国家和国际组织禁止生殖细胞编辑的临床应用,仅允许在严格监管下进行基础研究,以防止不可逆的遗传变化和社会风险。